【葡萄糖-6-磷酸酶簡介】：主要存在于肝臟、腎 臟、 小腸粘膜細胞、胰島細胞中，催化 6-磷酸葡萄糖水解為葡萄糖的關鍵酶，該反應是糖原分 解和糖異生的最后一步反應。在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品活性。

大鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)ELISA檢測試劑盒組成：（檢測范圍請參考說明書）

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實驗前準備要點：

1.     準備各種實驗儀器及材料（如：37℃恒溫箱，450nm酶標儀、高速離心機、高精度加樣器及槍頭等等）

2.     按照生物實驗室安全防護條例，穿著實驗服并佩戴乳膠手套做好防護工作

3.     使用前應將試劑盒內各試劑取出，平衡至室溫（至少30分鐘）

4.     嚴格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明書為準。

實驗所需自備試驗器材：

1.      酶標儀（450nm）

2.      高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒溫箱

4.      蒸餾水或去離子水

大鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)ELISA檢測試劑盒注意事項：

1.  實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。

2.  加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響實驗的準確性以及重復性。

3.  孵育：嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。 

4.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。

5.  建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數。 

6.  建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商聯系，如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。

 安全性 ：

1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

為了幫助您更好的解決在實驗中可能碰到的各種問題，上海軒澤康生物設計了這些問題指導，配以試劑盒內的說明書一起供您參考使用：

1.     問：ELISA試劑盒是否可以分批使用？

上海軒澤康生物解析：可以分批使用，試劑盒內酶標板都是可拆卸的。

2.     問：ELISA實驗整個過程需要多久？

上海軒澤康生物解析：從實驗方法來看，雙抗體夾心法實驗需要約3.5~4小時，競爭法實驗需要2-2.5小時。這個時間是單純的上機時間，不包括樣本采集時間和樣本處理時間。

3.     問：說明書上的檢測限不適用怎么辦？

上海軒澤康生物解析：我們的試劑盒檢測限都是根據常規樣本定標，如遇低于檢測限的特殊樣本可以聯系我司客服咨詢定制檢測限。

4.     問：為什么建議樣本和標曲做復孔？

上海軒澤康生物解析：①求平均值，確保實驗結果的準確性。②防止跳孔。③對自己的操作進行評估。④對試劑盒性能進行評估。

5.     問：樣本反復凍融對ELISA測試結果有影響嗎？

上海軒澤康生物解析：盡量避免反復凍融，收集處理完樣本后分裝冷凍。多次凍融易引起蛋白降解，測試出值水平下降，相對趨勢減小。

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