檢測前準(zhǔn)備工作：

1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3.20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

常見樣本處理及要求：

【血清樣本】：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置 2 小時(shí)或 4℃過夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：收集血液樣本應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞在溶解時(shí)會釋放具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，這種情況下，ELISA實(shí)驗(yàn)中將會出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng)，導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，出現(xiàn)假陽性結(jié)果。另外，樣本還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榧?xì)菌可能含有內(nèi)源性HRP，也會導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。

【血漿樣本】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：檢測前請仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。

【細(xì)胞培養(yǎng)物上清】：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個(gè)月內(nèi)檢測），或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測），避免反復(fù)凍融，標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

大鼠乳酸(LA)科研ELISA試劑盒 定量檢測組成：（檢測范圍請參考說明書）

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大鼠乳酸(LA)科研ELISA試劑盒 定量檢測操作步驟:

【試劑盒平衡至室溫】：從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

【標(biāo)準(zhǔn)品加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

【加樣】：樣本孔先加待測樣本 10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體 100μL

【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

【洗滌】：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。

【顯色】：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育15min。

【終止、測定】：每孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD 值。

常見問題解答：

1.     問：試劑盒的加樣量是多少?

上海軒澤康生物解答：加樣量10ul。先加40ul稀釋液，再加10ul樣本。

2.     問：試劑盒的檢測范圍可以調(diào)整嗎?

上海軒澤康生物解答：可以調(diào)整。不同的廠家因?yàn)橛玫臉?biāo)準(zhǔn)品不同，設(shè)定的檢測范圍也有區(qū)別。檢測范圍設(shè)定是根據(jù)樣本不同樣本實(shí)際含量來設(shè)定的，而且這個(gè)檢測范圍盡量滿足比較低的狀態(tài)，比如血清血漿，組織勻漿，細(xì)胞樣本等。

3.     問：免費(fèi)代測，寄樣需要注意什么?

上海軒澤康生物解答：凡是購買我司ELISA試劑盒，均可免費(fèi)代測。寄樣要求：樣本分裝在EP管/離心管/凍存管，標(biāo)好編號，干冰+泡沫箱運(yùn)輸，快遞優(yōu)先選擇順豐。

4.     問：樣本需要寄多少?

上海軒澤康生物解答：血清等液相樣本，根據(jù)代測指標(biāo)數(shù)量、是否做重復(fù)檢測而定。比如，測3個(gè)指標(biāo)，每個(gè)樣本做2次檢測，每個(gè)樣本實(shí)驗(yàn)需要60ul。為防止運(yùn)輸、實(shí)驗(yàn)過程中損耗，可以稍微多寄5-10ul。新鮮組織樣本需要郵寄不得少于50mg的量。

5.     問：試劑盒可以分次使用嗎?

上海軒澤康生物解答：我司酶標(biāo)板均可以拆開使用。未用完的試劑、試劑盒，密封保存于2-8℃冷藏。有效期6個(gè)月。

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