【Gremlin-1蛋白(GREM1)簡介】：是一種高度保守的20.7kDa，184個(gè)氨基酸的糖蛋白，屬于DAN家族。它因其在TGF beta信號(hào)傳導(dǎo)途徑中與骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMPs）的拮抗作用而聞名。它主要抑制肢體芽中的BMP2和BMP4，并作為自我調(diào)節(jié)反饋信號(hào)系統(tǒng)的一部分發(fā)揮作用，這對(duì)正常的肢體芽發(fā)育和指頭形成至關(guān)重要。它在肢體芽中對(duì)BMPs的抑制使成纖維細(xì)胞生長因子（FGFs）4和8以及聲猬（SHH）配體的轉(zhuǎn)錄上調(diào)，這是控制肢體芽發(fā)育進(jìn)展的信號(hào)系統(tǒng)的一部分。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中人Gremlin-1蛋白(GREM1)的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

檢測(cè)原理: 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被gremlin1蛋白（Gremlin-1）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的gremlin1蛋白（Gremlin-1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

檢測(cè)前準(zhǔn)備工作：

1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2.  從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3.  20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

人Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA檢測(cè)試劑盒組成：（檢測(cè)范圍請(qǐng)參考說明書）

注意：使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。 

實(shí)驗(yàn)需要但未提供的材料及耗材：

1、酶標(biāo)儀（建議儀器使用前提前預(yù)熱） 

2、精密移液器、吸頭、加樣槽 

3、蒸餾水或去離子水 

4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī) 

5、37℃水浴鍋或恒溫箱 

6、EP 管 

7、無粉一次性乳膠手

人Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)：

1.  實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。

2.  加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免第一孔與最后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。

3.  孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。 

4.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。

5.  建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 

6.  建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商聯(lián)系，如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

軒澤康生物ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

優(yōu)勢(shì)一: 種類豐富  可覆蓋人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬，可檢測(cè)指標(biāo)齊全如細(xì)胞 因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維檢測(cè)等等。

優(yōu)勢(shì)二： 適用范圍廣  可檢測(cè)血清、血漿、各組織樣本、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、腦脊液、糞便等多種標(biāo)本類型。

優(yōu)勢(shì)三： 質(zhì)量保證   我司所有產(chǎn)品在出庫前都會(huì)進(jìn)行質(zhì)檢，合格后才可出庫，確保產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您使用安心。我司承諾若有質(zhì)量問題，當(dāng)即免費(fèi)退貨退款！

優(yōu)勢(shì)四： 效果穩(wěn)定  經(jīng)過技術(shù)人員多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)調(diào)試和修正，試劑盒實(shí)驗(yàn)效果穩(wěn)定且檢測(cè)時(shí)間短（2-3小時(shí)即可完成），靈敏度高 重復(fù)性高 吸附性能好且價(jià)格實(shí)惠

樣品收集、處理及保存：

【細(xì)胞培養(yǎng)上清】：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

【血清】：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。

【血漿】：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【體液】：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【樣本要求】：樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

 【樣本保存】：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-80 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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